卵泡液中颗粒细胞分离和细胞培养

1. 收集临床病人的卵泡液；

2. 用40um的细胞筛过滤卵泡液；

3. 1000rpm/10min，室温离心，弃上清；

4. 1ml PBS重悬；

5. 将重悬液小心加入到2ml 50%的percoll液面上；

6. 2500rpm/25min，室温离心；

7. 溶液分为三层：无色上清液、中间的白色膜状细胞层、下层的红细胞层；

8. 吸取中间漂浮的白色膜状细胞层；

9. 用1ml PBS重悬白色膜状细胞层，吹打混匀；

10. 1500rpm/10min，室温离心，沉淀用DMEM/F12完全培养基重悬；

11. 将收集的颗粒细胞，用DMEM/F12完全培养基培养。

12. 代表性结果。